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懸浮細胞做好免疫熒光的關鍵步驟

更新時間:2023-02-17   點擊次數:2367次

您是(shi)否希(xi)望懸浮細胞的免疫(yi)熒光像貼壁細胞一樣容易?現在(zai)就是(shi)這樣!

靶點科技(ji)Shi-fix玻片允許懸浮細(xi)(xi)(xi)(xi)(xi)胞(bao)分(fen)層或直(zhi)接作為單層生長(chang)。簡單,無憂(you)的實驗方案,無需離心即可將(jiang)懸浮細(xi)(xi)(xi)(xi)(xi)胞(bao)固(gu)定(ding)到載玻片上。只(zhi)需將(jiang)細(xi)(xi)(xi)(xi)(xi)胞(bao)添加到載玻片上,等待30分(fen)鐘,用PBS洗滌(di)未結合的細(xi)(xi)(xi)(xi)(xi)胞(bao)并繼續免疫(yi)染(ran)色(或繼續培養以獲得所需的細(xi)(xi)(xi)(xi)(xi)胞(bao)密度(du))。

這些玻片也可(ke)用于染色懸(xuan)浮細(xi)胞(bao)以進行(xing)顯(xian)微(wei)鏡檢查(cha)(cha),或用于固(gu)定懸(xuan)浮細(xi)胞(bao)以進行(xing)共聚焦顯(xian)微(wei)鏡檢查(cha)(cha)。更重要的(de)是,如果需要,您(nin)還可(ke)以在細(xi)胞(bao)附(fu)著(zhu)在玻片上時刺激(ji)它們(men)。您(nin)可(ke)以像貼壁細(xi)胞(bao)一樣處理非貼壁細(xi)胞(bao)!

關鍵步驟:

1. 使用(yong)PBS清洗細(xi)胞,并將(jiang)細(xi)胞重(zhong)新懸浮于PBS中(2-5 百萬(wan)個/ml)

2. 把(ba)懸浮細(xi)(xi)(xi)胞(bao)專用免疫熒光玻片放置于12孔或(huo)者6孔細(xi)(xi)(xi)胞(bao)培養板孔里,直接(jie)滴(di)加(jia)細(xi)(xi)(xi)胞(bao)于懸浮細(xi)(xi)(xi)胞(bao)專用免疫熒光玻片上(每個玻片上20-30萬個細(xi)(xi)(xi)胞(bao))

3. 使(shi)(shi)細(xi)胞(bao)(bao)附著30分鐘(zhong),有些細(xi)胞(bao)(bao)需要延(yan)長附著時(shi)間,但不要超過1小時(shi)。使(shi)(shi)用約2ml PBS沖洗掉未結合(he)細(xi)胞(bao)(bao)(切(qie)勿直接(jie)垂直滴(di)(di)加PBS到玻片上細(xi)胞(bao)(bao),可將(jiang)PBS滴(di)(di)加于(yu)板孔里側(ce)邊,然(ran)后輕輕搖晃3-5分鐘(zhong))

4. 在顯微鏡下檢查(cha)細胞附著(zhu)情況,如果需要(yao)進一(yi)步培養(yang),那么加入1ml培養(yang)基即可;若(ruo)不培養(yang)即可直接固定,染色(se)。


四步(bu)走,操作示(shi)意圖(tu)如下(xia):





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