PBS LiposomesPBS對照脂質體

產品簡介：

清(qing)除巨(ju)噬細(xi)胞(bao)(depletion of macrophages)是研(yan)究巨(ju)噬細(xi)胞(bao)功(gong)能的(de)重要方法。荷蘭阿姆斯特(te)丹Vrije University 的(de)Nico van Rooijen教授開發的(de)一款Clodronate Liposome s，可以利(li)用巨(ju)噬細(xi)胞(bao)的(de)內吞機制(zhi)，將脂(zhi)質體包裹的(de)膜(mo)不(bu)通透性的(de)氯磷酸(clodronate)帶(dai)入細(xi)胞(bao)內，利(li)用“特(te)洛伊木馬(ma)機制(zhi)"從而達到去除巨(ju)噬細(xi)胞(bao)的(de)目的(de)。

作用原理:

兩親性磷(lin)(lin)脂(zhi)(zhi)分子在(zai)(zai)(zai)(zai)水(shui)(shui)中(zhong)(zhong)可以形(xing)成同(tong)心圓形(xing)式的磷(lin)(lin)脂(zhi)(zhi)雙分子層球體(ti)(ti)(ti)，磷(lin)(lin)脂(zhi)(zhi)雙分子層中(zhong)(zhong)間(jian)通(tong)過(guo)水(shui)(shui)相(xiang)分隔。溶(rong)解在(zai)(zai)(zai)(zai)水(shui)(shui)溶(rong)液中(zhong)(zhong)的氯(lv)(lv)磷(lin)(lin)酸鹽在(zai)(zai)(zai)(zai)形(xing)成脂(zhi)(zhi)質(zhi)體(ti)(ti)(ti)的過(guo)程(cheng)中(zhong)(zhong)被包(bao)裹進磷(lin)(lin)脂(zhi)(zhi)雙分子層之間(jian)的水(shui)(shui)相(xiang)中(zhong)(zhong)(如圖1)。游離的氯(lv)(lv)磷(lin)(lin)酸鹽不能自(zi)由(you)的通(tong)過(guo)脂(zhi)(zhi)質(zhi)體(ti)(ti)(ti)的磷(lin)(lin)脂(zhi)(zhi)雙分子層。隨著脂(zhi)(zhi)質(zhi)體(ti)(ti)(ti)被巨(ju)(ju)噬(shi)細(xi)(xi)胞(bao)吞(tun)噬(shi)，在(zai)(zai)(zai)(zai)巨(ju)(ju)噬(shi)細(xi)(xi)胞(bao)溶(rong)酶體(ti)(ti)(ti)磷(lin)(lin)酸酶的作用(yong)下，溶(rong)解在(zai)(zai)(zai)(zai)脂(zhi)(zhi)質(zhi)體(ti)(ti)(ti)水(shui)(shui)相(xiang)中(zhong)(zhong)的氯(lv)(lv)磷(lin)(lin)酸鹽就可以被逐步(bu)釋(shi)放出來(lai)，并累積在(zai)(zai)(zai)(zai)細(xi)(xi)胞(bao)內，當(dang)其(qi)達到一(yi)定濃度時，巨(ju)(ju)噬(shi)細(xi)(xi)胞(bao)將會受到不可逆轉的損傷，從而進入(ru)凋(diao)亡過(guo)程(cheng)。從死亡的巨(ju)(ju)噬(shi)細(xi)(xi)胞(bao)中(zhong)(zhong)釋(shi)放出來(lai)的氯(lv)(lv)磷(lin)(lin)酸鹽在(zai)(zai)(zai)(zai)細(xi)(xi)胞(bao)外的半衰期極短(大(da)約15min)，可以通(tong)過(guo)泌尿系(xi)統排除體(ti)(ti)(ti)外。

CONTROL LIPOSOME S (PBS)

對照脂質體（PBS）

SKU: P-005

Category: Liposomal formulations

clodronateliposome s脂質體P-005構成：

氯膦酸鹽脂質體：

由同(tong)心磷脂雙(shuang)層構成的人(ren)造球，該雙(shuang)層包裹著含有氯膦酸鹽的PBS（磷酸鹽緩沖液）水溶液。脂質體是顆粒，大小大。3微米。它們在(zai)PBS中(zhong)形成懸(xuan)浮(fu)液，在(zai)儲存時(shi)會沉淀，在(zai)試管(guan)或燒瓶的底部形成沉淀。在(zai)對實(shi)驗動(dong)物給藥之前，應先(xian)搖晃懸(xuan)浮(fu)液，以回收(shou)均(jun)勻(yun)的懸(xuan)浮(fu)液。

對照脂質體（PBS）：

對(dui)照(zhao)(zhao)脂質體不含(han)氯(lv)膦酸(suan)鹽。它們僅(jin)含(han)有PBS，可用于(yu)對(dui)照(zhao)(zhao)實驗，以查明(ming)注射氯(lv)膦酸(suan)鹽脂質體后觀察到的效果(guo)是(shi)否僅(jin)是(shi)由于(yu)巨噬細胞耗竭所致。

clodronateliposome s脂質體CP-005-005產(chan)品描述

磷(lin)脂(zhi)雙(shuang)層(ceng)由磷(lin)脂(zhi)酰膽堿和(he)膽固醇組成。將所有(you)脂(zhi)質體制(zhi)劑懸(xuan)浮在無菌磷(lin)酸(suan)鹽(yan)緩沖(chong)鹽(yan)水（PBS）中：

– 10 mM的Na2HPO4；
– 10毫米NaH2PO4；
– 140毫米氯化鈉。

我們所(suo)有(you)的脂質體(ti)均帶負電荷，因此(ci)不會一起(qi)阻塞。懸浮液中的脂質體(ti)沒有(you)大小，這意(yi)味著它也包含(han)越(yue)來越(yue)大的脂質體(ti)（大3微(wei)米）。平(ping)均而(er)言，脂質體(ti)的大小為1.7微(wei)米。

氯(lv)膦(lin)酸鹽(yan)(yan)(yan)脂質體：人工制備的脂質囊泡的懸浮液(ye)，包(bao)裹了(le)氯(lv)膦(lin)酸鹽(yan)(yan)(yan)。懸浮液(ye)中氯(lv)膦(lin)酸鹽(yan)(yan)(yan)的濃度約為(wei)。5毫(hao)克/毫(hao)升 氯(lv)膦(lin)酸鹽(yan)(yan)(yan)以(yi)CH2Na2Cl2O6P2·5 H2O的形式封裝(zhuang)在脂質體囊泡中。

PBS脂質(zhi)體：人工制備的(de)脂質(zhi)囊泡的(de)懸浮液(ye)，其(qi)中包裹了PBS水溶液(ye)。這些(xie)不含氯膦酸鹽，可用于對照(zhao)實驗。

熒(ying)光DiI脂(zhi)質(zhi)體：人工制備的(de)脂(zhi)質(zhi)囊泡(pao)的(de)懸浮液，其中包封了PBS水溶液，并(bing)用(yong)熒(ying)光染(ran)料DiI標記。它們不(bu)含氯(lv)膦酸鹽，可用(yong)于研(yan)究通過特定給藥(yao)途徑注(zhu)射的(de)脂(zhi)質(zhi)體是(shi)否能夠到達(da)要研(yan)究的(de)巨噬細(xi)胞。

儲存(cun)和使用說明

到達脂質體(ti)后，應將其儲存在4 – 8oC（或39 – 47oF）之間。脂質體(ti)懸浮(fu)液不得冷(leng)凍，也不要暴露于高(gao)溫下。這可(ke)能(neng)會對磷脂雙(shuang)層(ceng)造成干擾，可(ke)能(neng)導致氯膦酸鹽(yan)從脂質體(ti)中泄漏出來。

給藥前，首先(xian)使脂質(zhi)體(ti)達(da)到室溫，然后(hou)輕輕搖動或(huo)攪拌懸浮液。一(yi)段時(shi)間后(hou)，脂質(zhi)體(ti)易于沉淀，導致小瓶中的分布不(bu)均勻(yun)。當注(zhu)射(she)花費太多(duo)時(shi)間時(shi)，脂質(zhi)體(ti)甚至可能在注(zhu)射(she)器中沉淀。如果使用同一(yi)注(zhu)射(she)器注(zhu)射(she)多(duo)只動物，可能會導致劑量(liang)不(bu)同。

不建議(yi)稀釋(shi)懸浮液，但如有必要，請使用PBS或鹽水(shui)。

我們建議(yi)客戶在(zai)發貨后(hou)16周內使用脂質體制劑。強烈建議(yi)不(bu)要(yao)在(zai)到期(qi)(qi)日期(qi)(qi)之后(hou)使用。在(zai)此期(qi)(qi)間之后(hou)，污染的風險會增加，并且可能會發生輕微的功能喪失。

作(zuo)用機理

巨(ju)(ju)(ju)噬(shi)(shi)(shi)細(xi)(xi)(xi)(xi)胞(bao)(bao)(bao)(bao)(bao)在(zai)(zai)(zai)免疫(yi)(yi)和非免疫(yi)(yi)防(fang)御機制中起重要(yao)作用。它(ta)們(men)是(shi)抵御滲透(tou)到(dao)脊椎動物(wu)體(ti)內(nei)的(de)(de)細(xi)(xi)(xi)(xi)菌，病(bing)毒和其他形(xing)(xing)式的(de)(de)微(wei)生物(wu)污染的(de)(de)首道(dao)防(fang)線。巨(ju)(ju)(ju)噬(shi)(shi)(shi)細(xi)(xi)(xi)(xi)胞(bao)(bao)(bao)(bao)(bao)是(shi)大(da)型(xing)細(xi)(xi)(xi)(xi)胞(bao)(bao)(bao)(bao)(bao)，幾(ji)乎存在(zai)(zai)(zai)于所(suo)有(you)身體(ti)組(zu)織中，它(ta)們(men)可(ke)以具有(you)不同的(de)(de)形(xing)(xing)式和名稱（例(li)如(ru)庫普弗(fu)細(xi)(xi)(xi)(xi)胞(bao)(bao)(bao)(bao)(bao)，肺泡巨(ju)(ju)(ju)噬(shi)(shi)(shi)細(xi)(xi)(xi)(xi)胞(bao)(bao)(bao)(bao)(bao)，小(xiao)膠質細(xi)(xi)(xi)(xi)胞(bao)(bao)(bao)(bao)(bao)，破骨細(xi)(xi)(xi)(xi)胞(bao)(bao)(bao)(bao)(bao)，紅髓(sui)巨(ju)(ju)(ju)噬(shi)(shi)(shi)細(xi)(xi)(xi)(xi)胞(bao)(bao)(bao)(bao)(bao)）。巨(ju)(ju)(ju)噬(shi)(shi)(shi)細(xi)(xi)(xi)(xi)胞(bao)(bao)(bao)(bao)(bao)“清(qing)除"，它(ta)們(men)攝(she)入并消化(hua)可(ke)能是(shi)潛在(zai)(zai)(zai)病(bing)原體(ti)的(de)(de)所(suo)有(you)異物(wu)，微(wei)生物(wu)，癌細(xi)(xi)(xi)(xi)胞(bao)(bao)(bao)(bao)(bao)和細(xi)(xi)(xi)(xi)胞(bao)(bao)(bao)(bao)(bao)碎片。該過程稱為吞噬(shi)(shi)(shi)作用。巨(ju)(ju)(ju)噬(shi)(shi)(shi)細(xi)(xi)(xi)(xi)胞(bao)(bao)(bao)(bao)(bao)主要(yao)通過可(ke)溶性分子(zi)如(ru)細(xi)(xi)(xi)(xi)胞(bao)(bao)(bao)(bao)(bao)因子(zi)和趨化(hua)因子(zi)的(de)(de)介(jie)導來進一步(bu)調節(jie)許多非吞噬(shi)(shi)(shi)細(xi)(xi)(xi)(xi)胞(bao)(bao)(bao)(bao)(bao)的(de)(de)功能。他們(men)參與先天(tian)免疫(yi)(yi)，

脂(zhi)(zhi)質體(ti)(ti)是人工制備的(de)球(qiu)體(ti)(ti)，由同心(xin)磷(lin)脂(zhi)(zhi)雙(shuang)層(ceng)組成。當(dang)磷(lin)脂(zhi)(zhi)分(fen)(fen)(fen)(fen)散在水(shui)(shui)中(zhong)時(shi)，親水(shui)(shui)性頭部(bu)將構成脂(zhi)(zhi)質體(ti)(ti)的(de)兩個(ge)外部(bu)部(bu)分(fen)(fen)(fen)(fen)，而疏(shu)水(shui)(shui)性脂(zhi)(zhi)肪酸基團將構成內(nei)部(bu)部(bu)分(fen)(fen)(fen)(fen)（見圖(tu)1）。水(shui)(shui)室分(fen)(fen)(fen)(fen)隔雙(shuang)層(ceng)，親水(shui)(shui)分(fen)(fen)(fen)(fen)子(zi)可(ke)以溶解在其(qi)中(zhong)，形(xing)成脂(zhi)(zhi)質體(ti)(ti)包封(feng)的(de)分(fen)(fen)(fen)(fen)子(zi)。氯(lv)(lv)膦(lin)酸鹽(yan)（二氯(lv)(lv)亞(ya)甲基雙(shuang)膦(lin)酸酯(zhi)或(huo)Cl2MBP）是一種親水(shui)(shui)性分(fen)(fen)(fen)(fen)子(zi)，可(ke)以封(feng)裝在磷(lin)脂(zhi)(zhi)雙(shuang)層(ceng)中(zhong)。游離氯(lv)(lv)膦(lin)酸鹽(yan)不易穿(chuan)過細(xi)胞(bao)膜，并(bing)通過腎臟系統從循環(huan)中(zhong)迅速清(qing)除(chu)（即數(shu)分(fen)(fen)(fen)(fen)鐘內(nei)）。但是，氯(lv)(lv)膦(lin)酸鹽(yan)脂(zhi)(zhi)質體(ti)(ti)包埋在脂(zhi)(zhi)質體(ti)(ti)中(zhong)時(shi)，會被巨(ju)噬(shi)細(xi)胞(bao)吞噬(shi)，無法逃脫（見圖(tu)2）。磷(lin)脂(zhi)(zhi)雙(shuang)層(ceng)被溶酶(mei)體(ti)(ti)磷(lin)脂(zhi)(zhi)酶(mei)消化，而氯(lv)(lv)膦(lin)酸鹽(yan)未被消化并(bing)且(qie)保留在巨(ju)噬(shi)細(xi)胞(bao)中(zhong)。巨(ju)噬(shi)細(xi)胞(bao)攝入的(de)磷(lin)脂(zhi)(zhi)雙(shuang)層(ceng)和脂(zhi)(zhi)質體(ti)(ti)越多(duo)，在巨(ju)噬(shi)細(xi)胞(bao)內(nei)積累的(de)氯(lv)(lv)膦(lin)酸鹽(yan)越多(duo)。超(chao)過一定的(de)細(xi)胞(bao)內(nei)濃度，氯(lv)(lv)膦(lin)酸鹽(yan)將通過啟動程序性細(xi)胞(bao)死(si)亡（即凋亡）來消除(chu)巨(ju)噬(shi)細(xi)胞(bao)。

圖(tu)(tu)1.氯膦酸(suan)鹽脂質體的(de)示(shi)意圖(tu)(tu)。囊泡由(you)同心(xin)的(de)磷脂雙層構成，被(bei)水(shui)性隔室隔開。雙層由(you)親水(shui)和疏水(shui)基團組(zu)成。將氯膦酸(suan)鹽（在(zai)此以黑(hei)色方(fang)塊(kuai)表示(shi)）溶解在(zai)水(shui)溶液中并封(feng)裝在(zai)脂質體內。

圖2.巨噬(shi)細(xi)胞對氯膦(lin)(lin)酸(suan)鹽脂(zhi)質(zhi)體的(de)攝取和(he)消化示(shi)意圖。巨噬(shi)細(xi)胞通過胞吞作用攝入氯膦(lin)(lin)酸(suan)鹽脂(zhi)質(zhi)體，然后與(yu)含有(you)磷(lin)(lin)脂(zhi)酶的(de)溶酶體（L）融合(he)（箭(jian)頭）。磷(lin)(lin)脂(zhi)酶破壞的(de)磷(lin)(lin)脂(zhi)雙層越(yue)多，在巨噬(shi)細(xi)胞內釋放的(de)氯膦(lin)(lin)酸(suan)鹽（黑色方塊）越(yue)多。巨噬(shi)細(xi)胞終通過凋亡被殺死(si)。（N =巨噬(shi)細(xi)胞核）。

因此，氯膦酸鹽脂質體可用于通過消耗巨噬細胞來研究巨噬細胞功能。例如，它們可以應用于各種自身免疫性疾病，移植，神經系統疾病和基因治療的模型。氯膦酸鹽脂質體只有在可以達到的情況下才能耗盡巨噬細胞。一些組織可以形成脂質體的屏障。通過選擇氯膦酸鹽脂質體的正確給藥途徑，可以耗盡特定的器官或組織的巨噬細胞。有關管理協議的更多信息，請單擊此處。

PBS脂(zhi)(zhi)質體(ti)(ti)主要用(yong)(yong)于(yu)對照實驗(yan)。但是，這些也(ye)可(ke)以在某些時(shi)間(jian)段內通過飽和來(lai)阻(zu)止吞噬作用(yong)(yong)。因此(ci)，PBS脂(zhi)(zhi)質體(ti)(ti)不能(neng)代表(biao)正(zheng)常(chang)健康的，未阻(zu)斷的，未抑制的和未活化的巨噬細胞的對照實驗(yan)。當比較氯膦酸鹽脂(zhi)(zhi)質體(ti)(ti)和PBS脂(zhi)(zhi)質體(ti)(ti)的作用(yong)(yong)時(shi)，其作用(yong)(yong)因此(ci)可(ke)能(neng)小于(yu)預(yu)期。

有(you)關更多信息，請(qing)參見：

– Van Rooijen，N.和Sanders，A.（1994）。脂質體介導的巨噬細胞耗竭：作用機理，脂質體制備和應用。免疫學雜志，174（1-2），83-93。
– Van Rooijen，N.，Sanders，A.和van den Berg，TK（1996）。脂質體介導的氯膦酸鹽和丙am的細胞內遞送誘導的巨噬細胞凋亡。免疫學雜志，193（1），93-99。

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