Catalogue number: MG04（貨號：MG04）

1 ml MIDORIGreen Advance DNA/RNA stain for in gel or poststaining（1 ml MIDORIGreen Advance DNA / RNA染色劑，用于(yu)凝膠或后染色）

Benefits（優點）:

• Perfect in-gel staining of DNA/RNA in agarose gels（瓊脂糖凝膠中DNA / RNA的完美凝膠內染色）
• No toxicity, non-carcinogenic（無毒，無致癌性）
• Safe alternative to ethidium bromide（溴化乙錠的安全替代品）
• High fluorescence（高熒光）

• Optimal for UV-light（優(you)化適合紫外線）

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下一代凝膠內染色

MIDORIGreen Advance是(shi)第二代非致癌染料。 經過(guo)紫(zi)外線或藍/綠光激(ji)發后，信號更(geng)優化。 它保(bao)持了諸如(ru)非致癌性和優異的(de)信噪比(bi)(bi)等優勢。 如(ru)圖所示(shi)。 1當使(shi)用Blue / Green LED技術時，MIDORIGreen Advance比(bi)(bi)溴乙錠更(geng)好。

圖1：使用(yong)藍/綠LED透(tou)射照明器(qi)比較(jiao)MIDORIGreen Advance（左綠色(se)）和溴(xiu)化乙錠（右紅色(se)）的靈(ling)敏度。

MIDORIGreen Advance即使對于較小(xiao)的(de)DNA片(pian)段(duan)也顯示出很高的(de)靈敏度。 MIDORIGreen Advance的(de)稀釋倍數可高達(da)1：25000。 因此，對于100 ml瓊(qiong)脂糖(tang)凝膠染色，4-6μl足夠，導(dao)致?17至25升染色的(de)瓊(qiong)脂糖(tang)凝膠。

經驗證的安全性

良好地替代誘變的(de)(de)DNA染色劑溴化乙錠(ding)以傳遞(di)強(qiang)信號是*的(de)(de)。 MIDORIGreen Advance發出的(de)(de)信號強(qiang)度相(xiang)當。 但是，不得危及用戶的(de)(de)安(an)全。 因此，使(shi)用MIDORIGreen Advance進行了幾(ji)次測試，根據這些測試，MIDORIGreen Advance是安(an)全的(de)(de)。

染色Protocol：

凝膠內染色
準備100毫升的瓊脂糖凝膠溶液（濃度為0.8-3.0％）并加熱，直到溶液*澄清，看不到小的漂浮顆粒。
在凝膠溶液中加入4-6 µl MIDORIGreen Advance DNA Stain，輕輕混合。將凝膠冷卻至50-60ºC，然后將凝膠澆鑄到凝膠托盤中。當凝膠為固體時，加載樣品并進行電泳。
使用UV或(huo)LED照(zhao)明器檢測波段。黃色(se)或(huo)綠色(se)的明膠或(huo)玻璃紙(zhi)濾鏡應用于攝影。

后染
MIDORIGreen Advance DNA Stain后染液可以使用2-3次。
將要重復使用的染色溶液應優選在黑暗中于室溫下保存。
對于<0.5 cm厚的瓊脂糖凝膠，每100 ml緩沖液應使用10-25 µl的污漬。
合(he)適的(de)染色時間(jian)（5 – 60分鐘(zhong)）和污漬的(de)數量(liang)可能取決于凝膠的(de)厚度。

注意：不建議將SDS包含在加載緩沖液中使(shi)用，因為(wei)由污點和SDS相互作用引(yin)起的(de)條帶外觀(guan)！

客戶常見問題解答（FAQ）

問：我(wo)(wo)可以將Midori Green Advance與脈沖場凝膠電(dian)泳（PFGE）一起使用(yong)嗎？通常，我(wo)(wo)使用(yong)EtBr進行后期處理。

答：您可以在(zai)“Protocol”部分中找到進行(xing)后染色的方(fang)案。

問：您是否有處置Midori Green Advance的(de)詳細信息(xi)？我(wo)了(le)解該(gai)分子對(dui)光敏感，我(wo)想知道MGA凝(ning)膠在(zai)使用后(hou)是否可以在(zai)處置前暴露于光下(xia)？

答：MGA無毒，足以將其作為化學實驗室廢物處理。 MGA的發射率會被光破壞，但這并不意味著化學結構會發生變化。但是沒有必要破壞分子，因為它仍然無害。與溴化乙錠相比，這是*的優勢–無需特殊處理。

問：為(wei)什么不能以相同方式使用MGA和MGD？

答：化學結構(gou)(gou)*不(bu)(bu)同(tong)。我(wo)們測試(shi)(shi)過將(jiang)(jiang)MGD用(yong)(yong)作MGA，反(fan)之亦然(ran)。我(wo)們不(bu)(bu)能同(tong)時推薦這兩種(zhong)應用(yong)(yong)。當您(nin)嘗試(shi)(shi)將(jiang)(jiang)MGD用(yong)(yong)作MGA時，您(nin)需要大量(liang)MGD和階梯才能獲得可(ke)觀察的(de)(de)(de)(de)(de)波段(duan)。通過這種(zhong)方式(shi)可(ke)以檢測不(bu)(bu)到(dao)低(di)濃(nong)度(du)的(de)(de)(de)(de)(de)樣品(pin)。 MGD設計(ji)(ji)用(yong)(yong)于(yu)添加樣品(pin)，并且(qie)(qie)濃(nong)縮(suo)程度(du)遠低(di)于(yu)MGA。以MGA之類的(de)(de)(de)(de)(de)方式(shi)使用(yong)(yong)MGD是(shi)非(fei)常(chang)不(bu)(bu)經濟的(de)(de)(de)(de)(de)–您(nin)需要在凝(ning)膠中(zhong)添加10倍以上的(de)(de)(de)(de)(de)量(liang)才能觀察條帶(dai)。當您(nin)嘗試(shi)(shi)將(jiang)(jiang)MGA用(yong)(yong)作MGD時，也(ye)會出現(xian)問(wen)題，因為MGA的(de)(de)(de)(de)(de)濃(nong)度(du)過高，并且(qie)(qie)運行方向相(xiang)反(fan)。我(wo)試(shi)(shi)圖降低(di)MGA濃(nong)度(du)，在這種(zhong)情(qing)況(kuang)下(xia)，您(nin)會看到(dao)一(yi)些條帶(dai)，但它(ta)們與所使用(yong)(yong)的(de)(de)(de)(de)(de)稀釋液(ye)無(wu)關，非(fei)常(chang)弱。總結一(yi)下(xia)，您(nin)可(ke)以說兩種(zhong)染料都是(shi)針對不(bu)(bu)同(tong)的(de)(de)(de)(de)(de)應用(yong)(yong)（在凝(ning)膠中(zhong)和添加到(dao)樣品(pin)中(zhong)）設計(ji)(ji)的(de)(de)(de)(de)(de)（具有不(bu)(bu)同(tong)的(de)(de)(de)(de)(de)結構(gou)(gou)式(shi)）和優化的(de)(de)(de)(de)(de)，因此(ci)不(bu)(bu)建議嘗試(shi)(shi)以其他方式(shi)使用(yong)(yong)它(ta)們。

問：MGA和MGD有什(shen)么區別？這些(xie)污漬的穩定性(xing)如何？

答：主(zhu)要區別在(zai)(zai)于Midori Green Advance（MGA）用于凝(ning)膠和后染色（意味著它(ta)像溴(xiu)化乙錠一樣使用），而(er)Midori Green Direct（MGD）直接添加(jia)到樣品中。根據凝(ning)膠文(wen)檔系統的(de)不同，我們(men)建(jian)議(yi)您使用一種或另一種，但您可以在(zai)(zai)每種照(zhao)明(ming)器（UV 302、365 nm，藍色照(zhao)明(ming)器和藍色/綠色透射照(zhao)明(ming)器）中同時使用這兩種照(zhao)明(ming)器–只有(you)性能可以提高到合適水平。例如(ru)(ru)，如(ru)(ru)果(guo)用戶(hu)使用UV透照(zhao)器，我們(men)建(jian)議(yi)使用MGA，因為使用該色斑的(de)效果(guo)非常好。我們(men)的(de)藍/綠色LED儀器和MGD可帶(dai)來非常出色的(de)性能-*沒有(you)背(bei)景，而(er)且信號強度很高。兩種污(wu)漬在(zai)(zai)室溫下(xia)均(jun)穩定，因此(ci)在(zai)(zai)室溫下(xia)運輸沒有(you)問(wen)題，但我們(men)建(jian)議(yi)將污(wu)漬保(bao)存在(zai)(zai)4°C下(xia)。

問：MGA和MGD是(shi)否可以(yi)與瓊脂(zhi)糖(tang)和丙烯(xi)酰胺(an)凝膠一起使用？

答：我(wo)們的客戶給(gei)我(wo)們反饋說MDG和MGA（染色后）可(ke)用于丙烯酰胺凝(ning)膠，但主要是為瓊脂糖凝(ning)膠設計的。

問：如果我將MGA在-20°C下保存6天(tian)會怎樣？可(ke)以(yi)使用(yong)嗎？

答：凍結(jie)會破壞(huai)MGA的功能(neng)。您仍然(ran)可以嘗試，但我們的經驗(yan)使冷凍后(hou)的照(zhao)明失效。

問：我(wo)在瓊脂(zhi)糖(tang)凝(ning)膠中(zhong)使用Midori Green Advance，為什么在凝(ning)膠電泳35分鐘(zhong)后(hou)看不見小條(tiao)帶，您有(you)什么建議？

答：Midori Green Advance可能帶(dai)有電(dian)荷，并(bing)且與DNA的方向不同，因此凝(ning)膠(jiao)從底部脫色(se)(se)(se)。要查(cha)看小樂隊，您可以(yi)(yi)將運(yun)行時間減(jian)少(shao)到(dao)(dao)25分鐘。如果您想讓凝(ning)膠(jiao)運(yun)行更(geng)長的時間，那(nei)么您可以(yi)(yi)*跡(ji)。可以(yi)(yi)使(shi)用(yong)in凝(ning)膠(jiao)染(ran)色(se)(se)(se)，然(ran)后縮短后染(ran)色(se)(se)(se)時間，或者只對凝(ning)膠(jiao)進(jin)行后染(ran)色(se)(se)(se)，而無需先進(jin)行in凝(ning)膠(jiao)染(ran)色(se)(se)(se)。在(zai)這兩種情況下，整個(ge)凝(ning)膠(jiao)都(dou)會(hui)被染(ran)色(se)(se)(se)，并(bing)且觀察到(dao)(dao)非常低(di)的分子(zi)量帶(dai)。您也可以(yi)(yi)使(shi)用(yong)Midori Green Direct代(dai)替(ti)Midori Green Advance。該染(ran)料會(hui)添加(jia)到(dao)(dao)DNA中，因此無論電(dian)泳多長時間，每個(ge)條帶(dai)都(dou)會(hui)被染(ran)色(se)(se)(se)。另(ling)一個(ge)優點(dian)是不存在(zai)背景。特別是如果您使(shi)用(yong)藍色(se)(se)(se)或藍色(se)(se)(se)/綠色(se)(se)(se)LED燈(deng)代(dai)替(ti)紫(zi)外線，則會(hui)收到(dao)(dao)令人驚(jing)奇的信號。

問：在Midori Green Advance數據表(biao)上，描述了后(hou)期處理多可以使(shi)用2-3次。您可以在不損失太多敏感性(xing)的(de)情況下使(shi)用發布后(hou)解決(jue)方案多長時間？

答：實際上，我(wo)們(men)的客戶(hu)使用頻率超過2-3次(ci)。如果(guo)染色浴始終變暗，您可(ke)以在(zai)任何情況下使用2-3次(ci)而(er)不會降低信號強(qiang)度(du)。但也可(ke)以使用5 – 8次(ci)而(er)不會降低信號，具體取決(jue)于凝膠的大小和樣品量。如果(guo)您檢(jian)測到強(qiang)度(du)降低，則可(ke)以增加(jia)一點(dian)MGA，從而(er)獲得(de)與以前(qian)相(xiang)同的信號強(qiang)度(du)。

問：到期后可以使用MGA嗎？

答：是(shi)的(de)，您可以使用它。到(dao)期日期只是(shi)我(wo)們保證的(de)短時(shi)間，但通(tong)常會持(chi)續(xu)更長的(de)時(shi)間。